Il est conseillé de ne pas utiliser plus de trois couleurs différentes dans un site Internet afin de respecter le critère de sobriété. Le choix des couleurs devra correspondre, le cas échéant, aux couleurs de l’organisation (notamment aux couleurs du logo) et exprimer une ambiance particulière.
Quel que soit le choix des couleurs, il est recommandé d’établir une couleur prédominante, représentant la majeure partie de la page web, et une ou plusieurs couleurs secondaires plus dynamiques (plus vives), en moindres proportions , afin de mettre des éléments en exergue.
Les couleurs possèdent une symbolique implicite. Il est donc important de les choisir en connaissance de cause. En effet, les couleurs influent sur le comportement des individus :
physiquement : appétit, sommeil, température du corps, etc.
émotionnellement : sentiment de peur, de sécurité, de joie, etc.
psychologiquement : dynamisme, concentration, etc.

Le tableau ci-dessous récapitule la signification classiquement associée aux couleurs :

Calme, confiance, autorisation,
Bleu apaisement, sérénité, protection, sérieux, mystique, bonté, eau, espace, paix Froid, sommeil Voile, nouvelles technologies, informatique, médecine
Violet Délicatesse, passion, discrétion, modestie, religion. Mélancolie, tristesse, deuil, insatisfaction Culture, politique
Rose Charme, intimité, femme, beauté Naïveté Journal personnel, femmes

Chaleur, force, courage, Violence, colère, danger, Luxe, mode, sport, marketing,Rouge dynamisme, triomphe, amour, urgence, interdit, sang, enfer. médias
enthousiasme.
Tiédeur, confort, gloire, Orange bonheur, richesse, honneur, Feu, alerte Divertissement, sport, voyage, plaisir, fruit, odeur, tonus, vitalité.
Lumière, gaieté, soleil, vie,

Jaune pouvoir, dignité, or, richesse, Tromperie, égoïsme, jalousie, Tourismeorgueil, alerte immortalité.
Nature, vie végétale, secours, équilibre, foi, apaisement, Découverte, nature, voyage,

Vert repos, confiance, tolérance, éducation
espoir, orgueil, jeunesse, charité. Brun Calme, philosophie, terroir. Saleté Environnement Pureté, innocence, neige,
Blanc
propreté, fraîcheur, richesse. Mode, actualités Design, associations,
Gris Neutralité, respect.
organisations à but non lucratif Noir Sobriété, luxe, nuit. Mort, obscurité, tristesse, Cinéma, art, photographie et monotonie. interdit

La composition des couleurs a également une influence sur la perception des volumes. La composition des couleurs peut permettre de dégager une sensation de bien être, aussi bien pour la décoration d’une maison, que pour le graphisme d’un site Internet.
Le cercle chromatique est un bon outil permettant d’apréhender les interactions entre les couleurs. Le cercle chromatique est une représentation circulaire des couleurs, sur laquelle figurent les couleurs suivantes :
Les couleurs primaires (rouge, jaune, vert), couleurs « pures », ne pouvant être obtenues par mélange d’autres couleurs ;
Les couleurs secondaires (cyan, magenta, jaune), obtenues par mélange à parts égales de deux couleurs primaires adjacentes. Les couleurs secondaires sont diamétralement opposées à leur couleur complémentaire (soustractive) sur le cercle chromatique ;
Les couleurs tertiaires, obtenues par mélange d’une couleur primaire et d’une couleur secondaire.

Les couleurs sont également catégorises en couleurs « chaudes » (dont le ton est proche du rouge) et « froides » (dont le ton est proche du bleu).
Il existe des règles universelles régissant l’harmonie des couleurs, dûes à des propriétés physiques de l’oeil. En effet, lorsqu’il contemple une couleur, l’oeil crée automatiquement, sur son contour, un filtre de la couleur complémentaire. On parle de « contraste simultané ». Avec ce mécanisme, la perception des couleurs dépend des couleurs avoisinantes. Ainsi, le jaune paraîtra plus orangé lorsqu’il est associé à du bleu et le bleu paraîtra plus violet. Un bleu à côté d’un rouge apparaîtra vert, etc.
Par ailleurs, des couleurs voisines sur le diagramme chromatique créent une sensation d’équilibre pour l’oeil, en vertu de l’absence de contraste, on parle ainsi d’« harmonie d’analogie ».
Il existe donc globalement deux façons principales de choisir des couleurs harmonieuses :
en choisissant des nuances d’une même couleur, soit des couleurs de même teinte dont les tons sont proches,
en mêlant des couleurs complémentaires (chaudes et froides), c’est-à-dire des couleurs éloignées sur le diagramme chromatique. Pour deux couleurs, il suffit de choisir des couleurs complémentaires, diamétralement opposées ; pour trois couleurs, les couleurs choisies doivent former un cercle équilatéral, etc.

Enfin, des éléments de couleur chaude paraîtront globalement plus grands que des éléments de couleur froide.